核酸提取磁珠; EM001
该磁珠对短链DNA具有较强的富集能力,可以优选用于血浆中高效提取cfDNA和ctDNA,此外,它还可用于DNA甲基化的过程中。
货号 |
型号 |
规格 |
价格 |
货期 |
D21-020 |
EM001 |
50mg/mL*20mL |
询价 |
<5天 |
D21-200 |
EM001 |
50mg/mL*200mL |
询价 |
<5天 |
D21-02k |
EM001 |
50mg/mL*2L |
询价 |
<5天 |
描述
磁性硅颗粒在离液盐体系下(如胍盐)对核酸拥有良好的吸附作用,当条件改变时又可以快速分离释放核酸,是一种良好的核酸富集、提取、纯化工具。
英芮诚Enriching Beads®-EM001是一种磁性硅颗粒,该磁珠对短链DNA具有较强的富集能力,可以优选用于血浆中高效提取cfDNA和ctDNA。此外,它还可用于DNA甲基化的过程中。常规的磁性硅颗粒具有磁性核心以及二氧化硅涂层,但难以在高温下承受甲基化试剂(如亚硫酸氢盐)的侵蚀。EM001可在80~100℃下在甲基化试剂中稳定2小时以上,传统的DNA甲基化过程就因EM001可以显著缩短。典型的DNA甲基化的步骤是复杂的,首先从样品中将样本中的DNA进行结合、洗涤和洗脱,然后对洗脱下来的DNA进行甲基化处理,接着再次用磁珠进行结合、清洗和洗脱。而现在,在EM001的帮助下,DNA甲基化可以直接在磁珠的表面进行,无需洗脱,这不仅可以缩短整个流程的时间,节约磁珠和试剂的成本,而且实现DNA的提取及甲基化全程自动化操作。
特点
· 产品形貌为纳米级球形,粒径为500nm,具有较高比表面积;
· 产品粒径均匀、分散性好;
· 超顺磁性,磁响应性时间短;
· 可耐受高温高压;
· 铁泄露小于1ppm;
· 可承受甲基化试剂处理;
图集
传统磁性硅颗粒的结构示意图(a);EM001 的结构示意图(b)
保存条件
2~8℃
应用
· 从血清,血浆,中分离短链的核酸;
· DNA甲基化自动化过程;
应用案例
不同磁性硅颗粒对5mL血浆中cfDNA的提取效果
文献参考
[1] M.Wink, An Introduction to Molecular Biotechnology: Molecular Fundamentals, Methods and Application inModern Biotechnology,Wiley-VCH,Weinheim, Germany, 2006.
[2] K. Doyle, The Source of Discovery: Protocols and Applications Guide, PROMEGA, Madison,Wis, USA, 1996.
[3] L. Buckingham and M. L. Flaws, Molecular Diagnostics: Fundamentals, Methods, & Clinical Applications, F.A. Davis,Philadelphia, Pa, USA, 2007.
[4] L. J. Cseke, P. B. Kaufman, G. K. Podila, and C.-J. Tsai,Handbook of Molecular and Cellular Methods in Biology andMedicine, CRC Press, Boca Raton, Fla, USA, 2nd edition,2004.
[5] M. Nagy a,*, P. Otremba , C. Kru¨ger, S. Bergner-Greiner, P. Anders, B. Henske, M. Prinz , L. Roewer. Optimization and validation of a fully automated silica-coatedmagnetic beads purification technology in forensics. Forensic Science International 152, 2005.
其他
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出现这个问题是因为,ctDNA提取之后需要进行甲基化来完成后续有关癌症的诊断,其原理我们不做展开。市面上的很多甲基化的试剂盒,基本流程:先是提取ctDNA,然后洗脱。 在高盐体系给DNA修饰甲基,再用磁珠提取甲基化的DNA。在这个过程由于洗脱后甲基化,会打断流程的连贯性,导致这个流程长达3个小时。那么能不能直接带着磁珠完成甲基化的反应呢?答案是可以,这种时候,对应磁珠的要求比较高。在解释这个问题前,给大家普及一个概念,漏磁。在常规的核酸提取中,磁珠本身的磁性不会泄露,但甲基化是在2mol的亚硫酸氢盐,90°的高温,长达一小时的反应,常规的磁珠内核的四氧化三铁会和结合体系发生反应,四氧化三铁具有还原性,暴露在高盐高pH环境下,会被分解掉。反应结束后,磁吸吸不到磁珠。 如何判断漏磁现象呢?常规是判断不了的,教给大家一个简单的方法,把磁珠放在1mol的盐酸或者硝酸里面泡上1天,如果磁珠变黄了,磁性变弱,就是存在漏磁现象。市面上常规的磁珠都有漏磁现象,但是常规的样本提取反应条件不苛刻,即便有漏磁现象也不会产生现象。但是甲基化的极端条件不允许磁珠带着DNA直接反应,因而会导致过程增长。为此我们...